Визначення антитіл класу A проти гліадину ґрунтується на використанні
непрямого твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізований антиген – гліадин. Антитіла із зразка зв’язуються з антигеном
на поверхні лунки. Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату
мишачих моноклональних антитіл проти Ig А людини з пероксидазою хріну. У
результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою комплекс, що містить
пероксидазу.
Під час інкубації із розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ)
рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна
концентрації специфічних антитіл класу А проти гліадину. Концентрацію антитіл
класу А проти гліадину в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним
графіком залежності оптичної густини від вмісту антитіл класу А проти гліадину в
калібрувальних пробах.