Визначення вільної β-субодиниці ХГ ґрунтується на використанні «сендвіч»-
варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти вільної βсубодиниці ХГ людини. У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка відбувається зв’язування вільного βХГ, що міститься в досліджуваному зразку з антитілами на твердій фазі.

Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату мишачих
моноклональних антитіл проти вільної β-субодиниці ХГ людини з пероксидазою
хріну. У результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить
пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ)
рідина у лунках забарвлюється.

Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна
концентрації вільної β-субодиниці ХГ в досліджуваному зразку. Концентрацію
вільної β-субодиниці ХГ в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним
графіком залежності оптичної густини від вмісту вільної β-субодиниці ХГ в
калібрувальних пробах.