Визначення загального IgМ ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта
твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти загального IgМ
людини. У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка відбувається
зв’язування загального IgМ, який міститься в досліджуваному зразку, з
антитілами на твердій фазі.
Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югата мишачих
моноклональних антитіл проти загального IgМ з пероксидазою хріну. У
результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить
пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину
(ТМБ) рідина в лунках забарвлюється.
Інтенсивність забарвлення прямо
пропорційна концентрації загального IgМ в досліджуваному зразку.
Концентрацію загального IgМ в досліджуваних зразках визначають за
калібрувальним графіком залежності оптичної густини від вмісту загального IgМ
в калібрувальних пробах.