Визначення загального IgG ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта
твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти загального IgG
людини. У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка, відбувається
зв’язування загального IgG, який міститься в досліджуваному зразку, з антитілами
на твердій фазі.
Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату мишачих
моноклональних антитіл проти загального IgG з пероксидазою хріну. У результаті
утворюється зв’язаний із твердою фазою комплекс, що містить пероксидазу. Під
час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках
забарвлюється.
Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації
загального IgG в досліджуваному зразку. Концентрацію загального IgG в
досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності
оптичної густини від вмісту загального IgG в калібрувальних пробах.