Визначення кальцитоніну ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта
твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета
іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти кальцитоніну людини. В
лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка відбувається зв’язування
кальцитоніну, який міститься в досліджуваному зразку, з антитілами на твердій
фазі.
Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату мишачих
моноклональних антитіл проти кальцитоніну людини з пероксидазою хріну. У
результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить
пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ)
рідина в лунках забарвлюється.
Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна
концентрації кальцитоніну в досліджуваному зразку. Концентрацію кальцитоніну в
досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності
оптичної густини від вмісту кальцитоніну в калібрувальних пробах.