Визначення карциноембріонального антигену ґрунтується на використанні
«сендвіч»-варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній
поверхні лунок планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти КЕА
людини. У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка, відбувається
зв’язування КЕА, який міститься в досліджуваному зразку, з антитілами на твердій
фазі.
Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату мишачих
моноклональних антитіл проти КЕА людини з пероксидазою хріну. У результаті
утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить пероксидазу. Під
час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках
забарвлюється.
Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації
карциноембріонального антигену в досліджуваному зразку. Концентрацію
карциноембріонального антигену в досліджуваних зразках визначають за
калібрувальним графіком залежності оптичної густини від вмісту
карциноембріонального антигену в калібрувальних пробах.