Визначення нейрон-специфічної енолази ґрунтується на використанні
«сендвіч»-варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній
поверхні лунок планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти НСЕ
людини. У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка відбувається
зв’язування HСE, що міститься в досліджуваному зразку, з антитілами на твердій
фазі.

Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату іншого епітопу
мишачих моноклональних антитіл проти НСЕ людини з пероксидазою хріну. В
результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить
пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ)
рідина в лунках забарвлюється.

Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна
концентрації нейрон-специфічної енолази в досліджуваному зразку. Концентрацію
нейрон-специфічної енолази в досліджуваних зразках визначають за
калібрувальним графіком залежності оптичної густини від вмісту нейронспецифічної енолази в калібрувальних пробах.