Визначення прогестерону ґрунтується на використанні конкурентного
імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані
мишачі моноклональні антитіла проти прогестерону. Прогестерон зі зразка
конкурує з кон’югованим прогестероном за зв’язування з антитілами на поверхні
лунки.

У результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою комплекс, що
містить пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину
(ТМБ) рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення прямо
пропорційна концентрації прогестерону в досліджуваному зразку.

Концентрацію
прогестерону в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком
залежності оптичної густини від вмісту прогестерону в калібрувальних пробах.