Визначення трийодтироніну ґрунтується на використанні конкурентного імуноферментного аналізу.
На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані кролячі поліклональні антитіла проти T3.
Трийодтиронін зі зразка конкурує з кон’югованим Т3 за зв’язування з антитілами на поверхні лунки.

В результаті утворюється зв’язаний з твердою фазою комплекс, що містить пероксидазу. Під час інкубації з
розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність
забарвлення обернено пропорційна концентрації трийодтироніну в досліджуваному зразку. Концентрацію
трийодтироніну в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності оптичної
густини від вмісту трийодтироніну в калібрувальних пробах.