Визначення антигену CYFRA 21-1 ґрунтується на використанні «сендвіч»-
варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти розчинного
цитокератину 8/19 (CYFRA 21-1). У лунках планшета, при додаванні
досліджуваного зразка, відбувається зв’язування CYFRA 21-1, що міститься в
досліджуваному зразку, з антитілами на твердій фазі.

Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату моноклональних
антитіл проти антигену CYFRA 21-1 з пероксидазою хріну. В результаті
утворюється зв’язаний з твердою фазою «сендвіч», що містить пероксидазу. Під
час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках
забарвлюється.

Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації
антигену CYFRA 21-1 в досліджуваному зразку. Концентрацію антигену CYFRA
21-1 в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності
оптичної густини від вмісту антигену CYFRA 21-1 в калібрувальних пробах.