Визначення галактоманану ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти ГМ.
Зразки сироватки або БАЛ підлягають термообробці в присутності етилендіамінтетраацетату (ЕДТА) для дисоціації імунних комплексів та для осадження білків, які заважають тестуванню. У лунках планшета при додаванні досліджуваного зразка відбувається зв’язування антигену, який міститься у досліджуваному зразку, з антитілами на твердій фазі.
Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою суміші кон’югату мишачих моноклональних антитіл проти ГМ з біотином та кон’югату стрептавідину з пероксидазою хріну. У результаті утворюється зв’язаний із твердою фазою комплекс, що містить пероксидазу.
Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина у лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації ГМ в досліджуваному зразку.