Виявлення HBsAg в сироватці (плазмі) крові ґрунтується  на конкурентному твердофазному імуноферментному аналізі. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані моноклональні антитіла проти HBsAg.

При додаванні в лунки планшета досліджуваного зразка, зразка з високим вмістом антитіл проти HBsAg, біотинільованих моноклональних антитіл проти HBsAg, відбувається інгібіція зв’язування моноклональних антитіл та біотинільованих моноклональних антитіл з HBsAg в досліджуваному зразку. Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату стрептавідину з пероксидазою хріну.

В результаті утворюється зв’язаний з твердою фазою комплекс, що містить пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення пропорційна % інгібіції HBsAg в зразку сироватки (плазми) крові.