Виявлення HBsAg в сироватці (плазмі) крові ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізовані поліклональні антитіла проти HBsAg.

При додаванні в лунки планшета досліджуваного зразка сироватки (плазми) крові та біотинільованих поліклональних антитіл проти HBsAg (кон’югат А), відбувається зв’язування поліклональних антитіл і біотинільованих моноклональних антитіл з HBsAg в досліджуваному зразку. Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату стрептавідину з пероксидазою хріну (кон’югат В).

У результаті утворюється зв’язаний з твердою фазою «сендвіч», що містить пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна вмісту HBsAg в досліджуваному зразку сироватки (плазми) крові. Вміст HBsAg в сироватці (плазмі) крові розраховується за формулою, яка наведена в Інструкції.