Визначення антигену HE4 ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта
твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета
іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти природного антигену HE4
(отримані ТОВ «ХЕМА»). У лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка,
відбувається зв’язування HE4, що міститься в досліджуваному зразку, з антитілами
на твердій фазі.

Комплекс, що утворився, виявляють за допомогою кон’югату іншого епітопу
мишачих моноклональних антитіл проти нативного (природного) антигену HE4 з
пероксидазою хріну. У результаті утворюється зв’язаний із пластиком «сендвіч», що
містить пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках забарвлюється. Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації антигену HE4 в досліджуваному зразку.

Концентрацію антигену HE4 в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком
залежності оптичної густиниі від вмісту антигену HE4 в калібрувальних пробах.