Визначення IgG4 ґрунтується на використанні «сендвіч»-варіанта
твердофазного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок
планшета іммобілізовані мишачі моноклональні антитіла проти IgG4 людини. У
лунках планшета, при додаванні досліджуваного зразка, відбувається зв’язування
IgG4, що міститься в зразку, з антитілами на твердій фазі.

Комплекс, який утворився, виявляють за допомогою кон’югату мишачих
моноклональних антитіл проти IgG4 з пероксидазою хріну. У результаті
утворюється зв’язаний із твердою фазою «сендвіч», що містить пероксидазу. Під
час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина у лунках
забарвлюється.

Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації IgG4 в
досліджуваному зразку. Концентрацію IgG4 в зразках визначають за
калібрувальним графіком залежності оптичної густини від вмісту IgG4 в
калібрувальних пробах.