Визначення антигену MUC1 (М20) ґрунтується на використанні конкурентного імуноферментного аналізу. На внутрішній поверхні лунок планшета іммобілізований антиген MUC1.

Антиген зі зразка конкурує c мобілізованим антигеном за зв’язування з кон’югатом мишачих моноклональних антитіл проти антигену MUC1 людини з пероксидазою. В результаті утворюється зв’язаний з тверлдою фазою комплекс, що містить пероксидазу. Під час інкубації з розчином субстрату тетраметилбензидину (ТМБ) рідина в лунках забарвлюється.

Інтенсивність забарвлення обернено пропорційна концентрації антигену MUC1 (М20) в досліджуваному зразку. Концентрацію антигену MUC1 (М20) в досліджуваних зразках визначають за калібрувальним графіком залежності оптичної густини від змісту антигену MUC1 (М20) в калібрувальних пробах.